冷冻胚胎复苏之冷冻损伤评估

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冷冻胚胎复苏之冷冻损伤评估

冷冻损伤给胚胎内细胞的细胞膜、细胞骨架、细胞器和生物大分子会造成不同程度的损伤，严重影响胚胎的发育潜能及着床能力。胚胎学家除了要在冷冻复苏过程中采取一定预防措施外，还需要对胚胎复苏后的损伤情况进行评估，以便改进冷冻复苏方案。

胚胎的冷冻损伤可以从三个方面来评价：形态学、胚胎发育能力、着床的能力。

(1) 形态学：复苏后，评价胚胎的形态学特征最直接快速，是目前判断胚胎存活与否的主要手段。

冷冻胚胎复苏之冷冻损伤评估

  • 分裂期胚胎：细胞存活的标准是细胞大小正常，细胞膜清晰，胞质折光性正常，没有发生细胞解体、固缩、过度膨胀等情况。对于整个胚胎来说，有半数或半数以上的胚胎内细胞存活可以认为是该胚胎存活。另外，还需要注意透明带是否完整。根据存活卵裂球数目的多少，可以将分裂期胚胎的存活状况分为完整性存活和部分性存活。完整性存活是指解冻后胚胎内所有的卵裂球均存活，没有任何一个卵裂球受到冷冻损伤而死亡，这是最理想的冷冻效果。而部分性存活是指解冻后，胚胎内有一个或多个卵裂球因冷冻损伤而死亡造成胚胎内的卵裂球数目低于冷冻前的数目，但存活细胞超过半。
  • 囊胚：囊胚的存活从形态上判断也需要注意囊胚内各个细胞的细胞膜、折光性以及透明带的完整性，但对囊胚来讲，是否存活更准确的判断标准要依赖于发育能力的判断。

(2) 胚胎发育能力：复苏后,继续培养—段时间，观察胚胎的发育能力，比形态学判断更为确切但需要一定的时间。

  • 分裂期胚胎：分裂期胚胎解冻后，继续在体外培养一定时间，通常过夜(12小时以上)后，存活的胚胎细胞数能够增加，或者发生细胞间融合。
  • 囊胚：囊胚解冻后，存活的囊胚经过较短时间的培养，就能观察到囊胚腔重新扩张。

 

(3) 着床能力：采用种植的结局来判断冷冻复苏过程中胚胎着床能力是否造成损伤是最有临床意义的，但是由于胚胎着床除了受到冷冻复苏的影响外，还受到内膜准备方案、移植技术等多方面的影响，因此采用种植率难以分析冷冻复苏方案的具体步骤。

冷冻胚胎复苏之冷冻损伤评估

（ 作者：陈少轻）

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